全自动荧光显微镜的使用及基本操作

　　全自动荧光显微镜的使用

　　1.全自动荧光显微镜标本制造要求

　　a.载玻片

　　载玻片厚度应在0.8～1.2mm之间，太厚的坡片，一方面光吸收多，另一方面不能使激起光在标本上汇集。载玻片必需光亮，厚度平均，无明显自发荧光。有时需用石英玻璃载玻片。

　　b.盖玻片

　　盖玻片厚度在0.17mm左右，光亮。为了增强激起光，也可用干涩盖玻片，这是一种特制的外表镀有若干层对不同波长的光起不同干预作用的物质（如氟化镁）的盖玻片，它能够使荧光顺利经过，而反射激起光，这种反射的激起光可激起标本。

　　c.标本

　　组织切片或其他标本不能太厚，如太厚激起光大局部耗费在标本下部，而物镜直接察看到的上部不能被充沛激起。另外，细胞堆叠或杂质掩盖，影响判别。

　　d.封裱剂

　　封裱剂常用甘油，必需无自发荧光，无色透明，荧光的亮度在PH8.5～9.5时较亮，不易很快褪去。所以，常用甘油和0.5mol/L PH9.0～9.5的碳酸盐缓冲液的等量混合液作封裱剂。

　　e.镜油

　　普通用暗视野全自动荧光显微镜和油镜察看标本时，必需使用镜油。要特制的无荧光镜油，也可用上述甘油替代，液体石蜡也可用，只是折光率较低，对图像质量略有影响。

　　2.全自动荧光显微镜基本的操作

　　a.关闭房间内的电灯，开启显微镜汞灯；

　　b.依据样品标志的荧光素选择相应的滤光片；

　　c.放好样品，找到适宜的视野；

　　d.如需拍照，请确认照相机内已装好彩色胶卷；

　　e.开启自拍安装，选择手动档，通常拍摄速度在0.5-10秒内；

　　f.使用完毕，关闭一切电源并做好使用记载。